微生物檢測的三種情況
1 .一般性狀
微生物檢測的一般性狀包括外觀、厚度、 pH 值等。剛配制的液體培養基,其外觀應透明、清亮、無混濁、無沉淀,顏色符合要求。新鮮的固體培養基應具有特定的顏色,表面濕潤但無水汽、平整、光潔無凹坑和氣泡。整塊平板厚薄均勻,一般厚度在 3mm ,但 MH 平板的厚度不得小于 4mm 。斜面的長度不得超過試管長度的 2 / 3 。應經常觀察貯存培養基的質量是否合格。若試管內液體培養基液面降低,表明水分蒸發,培養基濃縮。當固體培養基發生顏色改變,表面干燥,出現裂紋或邊緣的瓊脂與平板或試管分離時,應不再使用。培養基的 pH 是細菌生長的重要條件之一,一般而言合格培養基的 pH 應在規定值上下 0.2 的范圍內。
2 .無菌試驗
新制備的
微生物檢測要按批號隨機抽取一定數量的樣品作無菌試驗。對于壓力蒸氣滅菌后傾注的固體培養基,抽樣后放 35 ℃ ± 1 ℃ 溫箱培養 24-48h ;滅菌后經無菌操作分裝的液體培養基要全部放入 35 ℃ ± 1 ℃ 溫箱內培養 24h ;對有些無需高壓滅菌只需煮沸消毒的選擇性培養基要取部分瓊脂,放入無菌肉湯管培養 24h :上述試驗證實無細菌生長時才算合格。若有細菌生長,說明培養基制備過程中已受雜菌污染,除了尋找原因外,應不再使用。
3 .細菌生長試驗
所有的
微生物檢測在使用前除了做無菌試驗外還必須做細菌生長試驗以測定培養基性能是否符合要求。要用已知的標準菌株按照 NCCLS 推薦的方法作質控。質控所需的標準菌株分 2 種:一種是已知的可在某種培養基上生長并產生典型生物學性狀的,對培養基中的某種物質產生陽性反應的菌株;另一種是用已知的不能在某種培養基上生長或對培養基中的某種物質產生陰性生化反應的菌株。表 2 列出 10 種常用固體培養基的質量鑒定標準及所需標準菌株。
無論是廠家的成品
微生物檢測還是實驗室自制的培養基,都應經過上述三方面的檢驗才能證實其質量是否合格。廠家應將所做的試驗內容形成書面的質量鑒定送交客戶保存。實驗室自行配制過程中應對上述鑒定內容有明確記載。此外還應對培養基配制原料的性狀、批號、失效期以及配制過程各個環節的操作形成記錄。